Precauzioni per l'elettroforesi di gel di polacreria

· POLIACRYLMAMIAgel deve da l'acrilmide monomer, materiale di partenza di polizia, catale è u dirittu di u mischju di sal è buffer è

· acrilamideè bis (n, n '- metilene doppiu acrylamide) hè a forma di monomer gel matrice.

· Ammonium Persulfate Start Project Polimerization ADHESIVY. A formulazione di a cola richiede una suluzione persunfulata di u 10% Ammonianu per a suluzione per l'acqua. A maiò parte di l'infurmazioni indicanu una necessità d'usu attivu. Tuttavia, a suluzione di u 10% pò esse postu à 4 ℃ per parechje settimane senza perdita significativa di l'attività. Fate finu à 10 ml è scartate quandu u cola falla à agregà.

Cunsigliu: u percentuale diacrilamidein cola di sequenza è a cola di proteina ùn hè micca u listessu. Se aduprate a premade acrylamide: suluzione BIS, assicuratevi di ottene a buttiglia ghjusta.

· N, n, n ", n '- tetramethyl Etylenianiazzina) hè un catalizatore, in una buttiglia marrone, pusata in u frigorifero. Aghjunghjite ghjustu prima di pour u cola.

· Vetru di Polyacrylamidi utilizati in l'elettroforesi di l'elettroforesi deve esse lavata prima è dopu ogni volta. Dopu l'elettroforesi, lavate cù una spazzola suave è un tela in acqua calda, rinfrescate cù acqua distillata è stà à secca.

· Umidità è a polvera pò causà cun polimeru cava. Prima di l'elettropheroeri, puliti a placa di vetru cù un pilotu di vetru è di sguassà cun una spazzola suave. Lavate cù l'acqua distillata è secca bè cù una sguassata di carta. Rinsing cù 70% etanol prima di sguassà cù u carta aiuta à pulisce è accelerà l'asciugà. Aghjunghjite di mostri d'acriadide successivamente: bis, suluzione di buffer, ammonumone, menu amonum. Scuzzulate bè è pour immediatamente.

Ùn hè micca necessariu degass polacrylamide prima di polimerizazione. (Acrylamide aduprata in un vacu per caccià e bolle perchè l'ossigenu inhibe a polimerizazione.)

Cunsiglii Horizontal Point Point Point.

· Pone un pezzu di carta negra in a casella di fondu, u fondo neru per fà alcuni buchi di mostra per vede più chjaramente.
Credite di collo di collo, ghjustu sopra u Colloid.
· Se u bordu hà una luce, accende e luci, lasciate luce brilla. Disegnate a mostra in a pipetta.
· Utilizendu u dispositivu di pipetting automaticu.
· In 10-200 mu 1 puntu di muvimentu liquidu pò esse adupratu in a maiò parte di i punti nantu à a mostra. Per i buchi di mostra assai chjucu (menu di 10μ1), a longa testa di pipette usata per a cola di sequenzione hè più conveniente.

· Pipetting solu immersi in a mostra, inhaling lentamente fluidu di muvimentu. A mostra pò appare appiccicante cù glicerin, è pompa rapida pò disegnà e bolle d'aria in a testa di pipette.

· Samples Dopu à a testa di pipetting inhalà, spustà a testa fluida in u bordu di a pipa o di u filu si succedenu u capu di i gocce. Attenti à ùn aspittà micca u mostra.

Pone a mostra in u burato di mostra

· Device Pipetting per mantene una piccula pressione, fate chì i mostri si move pocu u capu di u liquidu.
· U Testa di Pipetting inserita in u buffer, un pocu più altu ch'è i buchi di u locu, mantene a pressione positiva. A punta di a pipette pò esse inserita in un picculu burato.
· Lentamente è fermu i mostri fora. A punta di pipa hè posta sopra u burato di mostra di u puntu, è a mostra si affundarà in u burato. Lascia a Sample Sample per chjappà u burato di mostra invece di spinghje.
· Una ultima goccia di mostra cù a testa liquida, u liquidu si move à a seconda gamba, lentamente a mossa liquida, alluntanà u buffer

Cumu fà un campi verticale di cola?

· PUNTI VOTRUCCALE CLULE PUNTU FORMATU trà dui pezzi di vetru. In a cola assai sottile, a testa pipette ùn ponu mancu esse inserite trà duie piatti di vetru. Fighjate u glicerin! Mettite a testa pipette sopra u buratu di mostra è a mostra si affundarà in u burato.
· Cartazione di Pointanfà, assicurà pò Mettenu u puntu verticale di Polypropilene Lavà l'acrylamide non unpolimerizata è l'acqua chì pò appare in u fondu di u burato di mostra. L'acqua pò fà u pirore di mostra significativamente più chjucu. Aduprate una siringa 25ml o 50ml è una agulla di 18-cauge. Pour in u buffer di l'elettroforesi è a flussu currettamente u burato di mostra.
· Pò esse difficiule di vede u burato di mostra, ma à u stessu, u restu hè faciule. Se ci sò buchi eccessivi, u buffer di mostra pò esse pruvatu cù BROMOPHENOL BLU.